【铁皮石斛组培讲义】在植物组织培养技术中，铁皮石斛（Dendrobium officinale）因其药用价值高、市场需求大而成为研究与应用的热点。铁皮石斛组培技术不仅能够实现其快速繁殖，还能有效保护野生资源，缓解因过度采挖导致的生态环境问题。本讲义旨在系统介绍铁皮石斛的组织培养流程，帮助学习者掌握关键操作要点与常见问题的应对方法。

一、铁皮石斛的生物学特性

铁皮石斛属于兰科植物，是一种附生型草本植物，主要分布于中国南方及东南亚地区。其茎干呈圆柱形，表面有明显的节间，具有较强的适应性与抗逆性。由于其富含多糖、生物碱等活性成分，被广泛用于中药制剂和保健品中。

在自然条件下，铁皮石斛生长缓慢，繁殖能力较弱，因此通过组培技术进行人工繁育具有重要意义。

二、组培材料的选择与处理

1. 外植体选择

常用的外植体包括嫩茎、芽尖、种子、叶片等。其中，芽尖和嫩茎是最常用的材料，因其细胞分裂能力强，易于诱导愈伤组织和再生苗。

2. 表面灭菌处理

外植体需经过严格的消毒处理，以避免污染。一般采用75%酒精浸泡30秒至1分钟，随后用0.1%升汞溶液浸泡5-8分钟，最后用无菌水冲洗3-5次。

三、培养基的配制与优化

铁皮石斛的组培培养基通常以MS（Murashige and Skoog）为基础，根据不同的培养阶段进行调整：

- 初代培养：使用MS + 6-BA 2mg/L + IAA 0.5mg/L，促进芽的萌发。

- 继代增殖：可适当提高6-BA浓度（如2-4mg/L），并加入少量IAA或NAA，以增强分生能力。

- 生根培养：将培养基改为MS + IBA 0.5-1mg/L，促进根系发育。

此外，培养基中还需加入适量的活性炭（0.5-1g/L），以吸附有害物质，改善培养环境。

四、培养条件与管理

1. 光照

铁皮石斛在组培过程中需要一定的光照，一般设置为16小时光照/8小时黑暗，光照强度控制在2000-3000 lux。

2. 温度

最适生长温度为25±2℃，过高或过低都会影响生长速度和成活率。

3. 湿度

环境湿度应保持在60%-70%，可通过喷雾或加湿器调节。

4. 定期观察与换瓶

每隔10-15天检查一次培养情况，及时去除污染苗，并根据生长状况更换培养基。

五、常见问题与解决方法

| 问题 | 原因 | 解决方法 |

|------|------|----------|

| 外植体污染 | 灭菌不彻底 | 加强灭菌步骤，延长升汞浸泡时间 |

| 芽分化不良 | 激素比例不当 | 调整6-BA与IAA的比例 |

| 生根困难 | 生根培养基不合适 | 降低琼脂浓度，增加IBA含量 |

| 黄化苗 | 光照不足或营养不良 | 提高光照强度，补充微量元素 |

六、组培苗的移栽与驯化

当组培苗长至3-5片真叶、高度约5cm时，即可进行移栽。移栽前需进行炼苗处理，即逐渐减少温室内的湿度和光照，使幼苗适应外界环境。

移栽基质可选用珍珠岩、蛭石、椰糠等混合物，保持湿润但不过度积水。移栽后应遮阴保湿，待植株稳定后逐步增加光照，最终过渡到自然环境中。

七、总结

铁皮石斛的组织培养是一项技术性强、操作规范的系统工程。通过科学的培养基配方、合理的培养条件以及细致的管理，可以显著提高繁殖效率和成活率。随着生物技术的发展，铁皮石斛组培技术将在中药材生产、生态保护和科研领域发挥越来越重要的作用。

参考文献

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