【2017年整理】磷酸盐缓冲液配制方法
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline, PBS)是一种广泛应用于生物学和医学领域的溶液,主要用于维持细胞或组织样本的生理环境。PBS因其稳定的pH值和渗透压而备受青睐,常用于细胞培养、免疫学实验以及生物样品的清洗等。
在实验室中,PBS的配制需要严格按照配方进行,以确保其性能稳定。以下是根据2017年整理的经典配制方法,供参考:
配制材料:
- 磷酸二氢钾(KH₂PO₄)
- 氢氧化钠(NaOH)
- 氯化钠(NaCl)
- 无水磷酸氢二钠(Na₂HPO₄)
配制步骤:
1. 称量试剂
根据所需PBS的体积,精确称取一定量的试剂。通常每升PBS需使用以下成分:8克氯化钠、0.2克磷酸二氢钾、1.44克无水磷酸氢二钠以及0.2克氢氧化钠。
2. 溶解试剂
将上述试剂依次加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。注意控制温度,避免过高影响溶液稳定性。
3. 调节pH值
使用精密pH计检测溶液的pH值,并通过添加氢氧化钠或磷酸二氢钾进行微调,使其达到7.4左右。
4. 定容与灭菌
将溶液定容至目标体积后,通过0.22微米滤膜过滤除菌,或采用高压蒸汽灭菌法处理。
5. 储存
制备好的PBS应储存在4℃冰箱中备用,避免长时间暴露于高温环境中。
通过以上步骤,您可以成功配制出符合实验需求的磷酸盐缓冲液。值得注意的是,在实际操作过程中,务必保持仪器设备的清洁,并严格遵守无菌操作规程,以确保溶液的质量和安全性。
希望这份整理自2017年的配制方法能为您的实验提供帮助!